Les techniques de reproduction assistée (TRA) ont révolutionné le traitement de l'infertilité, mais l'amélioration des résultats reste un défi constant. La sélection des spermatozoïdes avant la fécondation est un domaine en évolution rapide, visant à identifier les spermatozoïdes les plus aptes à féconder l'ovocyte et à donner naissance à un embryon viable.
Rôle du spermatozoïde dans la fécondation
Pendant longtemps, le spermatozoïde a été considéré comme un simple transporteur du matériel génétique paternel, sans influence sur le développement embryonnaire ultérieur. Cependant, des recherches récentes ont mis en évidence le rôle actif du spermatozoïde dans le processus de fécondation et le développement embryonnaire précoce.
Techniques de préparation de l'échantillon séminal
Les techniques de routine pour la préparation de l'échantillon séminal visent à sélectionner les spermatozoïdes ayant une meilleure motilité et morphologie. Ces techniques comprennent généralement la centrifugation et le swim-up, qui permettent de séparer les spermatozoïdes mobiles des débris cellulaires et des spermatozoïdes immobiles.
Sélection des spermatozoïdes pré-apoptotiques
La sélection de spermatozoïdes aptes dans les échantillons séminaux qui présentent un taux élevé de fragmentation de l’ADN a été favorisée par l’apparition de techniques de sélection des spermatozoïdes préapoptotiques (en phase de mort cellulaire programmée). L'apoptose des spermatozoïdes se manifeste par l'exposition de la phosphatidylsérine. Généralement, ces spermatozoïdes ne peuvent pas être détectés parmi les spermatozoïdes normaux.
La technique la plus couramment utilisée est la séparation cellulaire par activation magnétique (MACS), qui permet de retenir les spermatozoïdes à plus faible potentiel. La technique MACS, basée sur l'utilisation de billes magnétiques couplées à un anticorps dirigé contre la phosphatidylsérine, une molécule présente à la surface des spermatozoïdes apoptotiques, permet de retenir ces spermatozoïdes et de sélectionner les spermatozoïdes intacts et vivants. C’est une sélection des spermatozoïdes présentant une intégrité dans leur ADN. Les spermatozoïdes intacts et vivants passent par la colonne et sont collectés pour une utilisation ultérieure.
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Des études ont été menées pour comparer les résultats des traitements dans lesquels la technique MACS a été utilisée pour compléter les techniques d’entraînement conventionnelles pour la sélection des spermatozoïdes. Une augmentation des taux de division embryonnaire et de grossesse a été observée. Augmentez vos chances de concevoir un bébé en bonne santé. Nous résolvons les problèmes de manière globale.
IMSI (Injection Intracytoplasmique de Spermatozoïdes Morphologiquement Sélectionnés)
IMSI (Intracytoplasmic Morphogically selected Sperm Injection) ou Evaluation ultrafine de la morphologie de la tête des spermatozoïdes mobiles avant microinjection. L’IMSI est une évolution de la technique ICSI classique (injection d’un spermatozoïde dans l’ovocyte) où le spermatozoïde est choisi après observation à très fort grossissement (X 6000 au lieu de x 400 en ICSI classique).
La capacité des ovocytes à être fécondés est évaluée de manière plus précise. Seuls les ovocytes matures seront micro-injectés. Pour chacun des ovocytes, un spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. Sous contrôle d’un microscope, le biologiste maintient l’ovocyte avec une micropipette et, avec une autre micropipette, aspire le spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. sélectionné puis l’injecte à l’intérieur de l’ovocyte. Cette micro-injection est renouvelée pour chaque ovocyte fécondable. Les ovocytes sont ensuite remis dans une boîte de culture dans l’incubateur à 37° C pour les étapes suivantes.
On propose d’abord un test d’évaluation (MSOME : Motile Sperm Organelle Morphology Examination) qui consiste à établir une classification des anomalies retrouvées, et en particulier rechercher la présence de ces vacuoles qui peuvent être observées sur des spermatozoïdes d’aspect normal en analyse classique. C’est une technique dite de 2e intention, c'est-à-dire qu’elle vous sera proposée après au moins un échec d’ICSI.
ICSI physiologique
Actuellement, il est possible de réaliser une évaluation morphologique en choisissant les spermatozoïdes qui vont être micro-injectés par des optiques spéciales qui permettent de les visualiser plus de 6000 augmentations (IMSI). Il est aussi possible de réaliser le dénommé « ICSI physiologique », où nous employons de l’acide hyaluronique, bien sur la plaque de micro-injection (PICSI) ou bien dans le milieu de culture (« SpermSlow ») afin de sélectionner des spermatozoïdes mûrs, lesquels, à priori, montrent une diminution des altérations chromosomiques.
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L’utilisation de colonnes d’annexine type MACS avant l’ICSI nous permet aussi de sélectionner des spermatozoïdes pré-apoptotiques, lesquels entreraient en mort cellulaire programmée et ne pourraient pas donner lieu à des embryons évolutifs.
Rôle de l'acide hyaluronique (AH)
L’acide hyaluronique (AH) est une molécule présente dans la matrice extracellulaire de l'ovocyte. Les spermatozoïdes matures ont la capacité de se lier à l'AH, ce qui permet de les identifier et de les sélectionner pour la micro-injection. Cette technique, appelée PICSI (Physiological ICSI), permet de sélectionner les spermatozoïdes unis, donc matures, pour la micro-injection.
Cette méthode permettrait de réduire le taux de fausses-couches ou de grossesses.
Morphologie du spermatozoïde et ICSI
Les caractéristiques morphologiques du spermatozoïde sont le principal déterminant de la capacité de fécondation masculine. Des critères spécifiques ont été établis pour déterminer une morphologie correcte du spermatozoïde (Kruger et Coetzee, 1999). Mais, comment évaluer cette morphologie pendant l’ICSI?
Dans les laboratoires de fécondation in vitro, la technique ICSI est réalisée à 400x (grossissement de l’observation microscopique). Pour évaluer l’ultramorphologie des spermatozoïdes, une observation à 1000x est nécessaire. Les études réalisées qui évaluent l’efficacité de ces techniques n’ont pas constaté de différences dans les taux de fécondation et la qualité embryonnaire lorsqu’elles sont réalisées à la place de l’ICSI conventionnel.
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Intégrité de l'ADN du spermatozoïde
Dre. L’endommagement de l’ADN d’un spermatozoïde peut représenter la cause d’infertilité masculine. Les spermatozoïdes avec l’ADN endommagé ne sont pas capables de féconder l’ovule. Si le spermatozoïde endommagé féconde un ovule, il existe une chance que l’embryon formé répare les dommages et les cassures.
Fécondation in vitro avec ICSI
La fécondation in vitro avec ICSITechnique d’assistance médicale à la procréation (en anglais « Intra Cytoplasmic Sperm Injection »). On appelle également cette technique « micro-injection », « fécondation assistée » ou « fécondation avec micromanipulation »…. consiste en l’injection d’un seul spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. dans l’ovocyte. L’ICSITechnique d’assistance médicale à la procréation (en anglais « Intra Cytoplasmic Sperm Injection »). On appelle également cette technique « micro-injection », « fécondation assistée » ou « fécondation avec micromanipulation »…. La couronne de cellules qui entoure l’ovocyte est enlevée pour visualiser l’endroit où va se faire la micro-injection : c’est la « décoronisation ».
Si le sperme ne contient pas de spermatozoïdes (azoospermie) et selon la cause de l’azoospermie, des spermatozoïdes peuvent être prélevés chirurgicalement dans les voies génitales masculines ou dans le testicule. Le prélèvement chirurgical peut avoir lieu le jour de la ponction (ICSITechnique d’assistance médicale à la procréation (en anglais « Intra Cytoplasmic Sperm Injection »). On appelle également cette technique « micro-injection », « fécondation assistée » ou « fécondation avec micromanipulation »…. synchrone) ou préalablement à la ponction. Les spermatozoïdes sont alors congelés (ICSITechnique d’assistance médicale à la procréation (en anglais « Intra Cytoplasmic Sperm Injection »). On appelle également cette technique « micro-injection », « fécondation assistée » ou « fécondation avec micromanipulation »….
Dans le cas où vos ovocytes ou vos spermatozoïdes ne seraient pas utilisables, votre médecin peut vous orienter vers le don de gamètes. Des effets indésirables peuvent survenir en cours de traitement. On observe généralement un taux légèrement plus élevé de poids de naissance inférieur à la normale et de naissances prématurées chez les enfants conçus par FIV. Les complications liées au geste chirurgical de ponction (hémorragie, infection, problème anesthésique…) sont rarissimes. Celles qui sont liées à une réponse excessive à la stimulation ovarienneTraitement médicamenteux à base d’hormones (injections ou comprimés), permettant de stimuler la maturation d’un ou plusieurs follicules par chacun des ovaires…., appelée hyperstimulation, sont également rares. Elles se traduisent par un gonflement et des douleurs abdominales, une prise de poids brutale, des troubles digestifs et parfois une gêne respiratoire. Concernant les risques de cancer, aucune donnée ne permet aujourd’hui de mettre en cause les traitements liés à l’Assistance Médicale à la Procréation. La FIV ICSI est une technique où l’on va choisir un seul spermatozoïde pour l’injecter en laboratoire dans un ovocyte et essayer d’avoir un embryon pour ensuite le replacer dans l’utérus de la femme. Pour moi, c’était quasiment tous les jours. On nous appelle le soir en nous disant « voilà, votre taux d’hormones était à tant, donc ce soir il faut faire une piqûre de tant de millilitres », jusqu’à ce que les ovocytes soient considérés comme assez matures pour être ponctionnés. C’est comme un examen chez le gynécologue, ce n’est pas douloureux.
FIV classique, ICSI et IMSI
La FIV classique est la forme la plus ancienne de fécondation in vitro et demeure l’une des techniques les plus utilisées aujourd’hui. La FIV classique est généralement utilisée dans des cas d’infertilité où les spermatozoïdes sont suffisants en nombre et en qualité.
L’ICSI ( Injection Intracytoplasmique de Spermatozoïdes ) est une technique plus récente qui permet de surmonter des problèmes de quantité de spermatozoïdes ou de fécondation des ovocytes par les spermatozoïdes. L’ICSI est utilisée dans les cas d’infertilité masculine sévère, notamment lorsqu’il y a une faible concentration de spermatozoïde ou une mauvaise motilité.
L’IMSI est une variation de l’ICSI, mais elle se distingue par une étape supplémentaire de sélection des spermatozoïdes. Le choix de la méthode de FIV dépend de plusieurs facteurs comme la cause de l’infertilité, ainsi que la qualité du sperme. Qualité des spermatozoïdes : Si la qualité du sperme est normale, une FIV classique peut suffire.
La FIV est une méthode de traitement de l’infertilité qui a fait ses preuves, mais chaque couple et chaque situation sont uniques.
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