Introduction
Le lactate, produit de la glycolyse anaérobie, est un indicateur crucial de l'état métabolique cellulaire. Son dosage est devenu un outil précieux dans divers domaines, allant de la recherche fondamentale à la pratique clinique quotidienne. Cet article explore les méthodes d'analyse du lactate, leur pertinence clinique et les facteurs influençant les résultats.
Qu'est-ce que le Lactate?
L'acide lactique est un acide faible dont la base conjuguée est le lactate. Le pKa de ce couple acide-base est de 3,86. Dans le sang, dont le pH est compris entre 7,35 et 7,45, le lactate est la forme prédominante car le pH sanguin est supérieur au pKa. Le lactate existe sous deux stéréo-isomères : la forme dextrogyre (D(-)lactate) et la forme lévogyre (L(+)lactate). Les analyseurs disponibles à ce jour dosent tous les énantiomères des lactates. En conséquence, le recours à un examen chromatographique et/ou par spectrométrie de masse est nécessaire pour différencier les deux formes. Notamment, les hyperlactatémies dues aux D(-)lactates sont rares.
Chez les mammifères, la production de lactate est un phénomène physiologique. Le glucose suit la voie de la glycolyse, aboutissant à la production de pyruvate. Les lactates sont un produit de la fermentation, une voie métabolique anaérobie. Un organisme sain produit donc des lactates de manière physiologique.
La concentration normale de lactate est d’environ 0,6-1,4 mmol/L et les concentrations augmentent en cas de stress biologique.
Méthodes d'Analyse du Lactate
Les kits d’analyse du lactate sont indispensables pour quantifier le lactate dans les échantillons biologiques. La lactatémie se définit comme la concentration sanguine en acide lactique. Le dosage de la lactatémie est aujourd’hui accessible à tous les praticiens. Il est aussi possible de le demander à certains laboratoires de biologie vétérinaire. Traditionnellement, la mesure du lactate sanguin était effectuée en laboratoire avec des dispositifs de table comme le Biosen. Aujourd’hui, il existe plusieurs dispositifs portables comme le Lactate Scout ou le Lactate Pro 2 qui ont participé à la démocratisation de la mesure du lactate sur le terrain par les entraîneurs et les athlètes.
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Kits d’analyse colorimétrique
Ces kits utilisent des réactions colorimétriques pour mesurer les concentrations de lactate. Une procédure typique implique des réactions enzymatiques couplées à une sonde colorimétrique qui change de couleur proportionnellement à la quantité de lactate présente.
Kits d’analyse fluorométrique
Les analyses fluorométriques quantifient le lactate via des mesures de fluorescence.
Analyseurs portables
Outre la facilité d’utilisation sur le terrain, ces appareils présentent également l’avantage d’être moins chers à l’achat et nécessitent des échantillons de sang plus faibles pour l’analyse. Bien que ces derniers aient fait l’objet de validations scientifiques, il convient de suivre certaines bonnes pratiques afin de s’assurer de résultats précis et fiables.
Pour les analyseurs portables, les prélèvements sanguins capillaires s’effectuent via des réactifs à usage unique. Ces derniers doivent être conservés à l’abri de la lumière et à température constante en suivant les recommandations des fabricants (-18°C à 8°C pour les réactifs Lactate Scout Sport et 1 à 30 °C pour les réactifs lactate Pro 2). Avant de procéder à la mesure, le réactif et l’appareil doivent être ajustés à la température ambiante.
Prélèvement sanguin capillaire : Bonnes pratiques
Afin d'assurer la fiabilité des résultats lors de l'utilisation d'analyseurs portables, il est crucial de respecter certaines bonnes pratiques lors du prélèvement sanguin capillaire :
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- Hygiène des mains : Se laver les mains précautionneusement en utilisant un savon et de l’eau ou une solution hydro-alcolique durant 30 secondes.
- Préparation du site de ponction : Nettoyer la zone de prélèvement avec un antiseptique approprié (alcool à 70%).
- Première goutte de sang : Essuyer la première goutte de sang car elle peut être contaminée par les fluides ou des débris tissulaires, à l’aide d’une compresse de gaze ou un morceau de coton.
- Prélèvement de l'échantillon : Appuyer légèrement autour de la zone de prélèvement pour obtenir une goutte de sang. Prélever la goutte de sang avec l’appareil doté du réactif. La goutte ne doit pas couler, le réactif doit être placé à proximité de la goutte de sang de façon perpendiculaire à la goutte afin que le réactif absorbe par capillarité le sang dans la chambre de mesure. La goutte doit être suffisamment grande pour remplir la chambre de mesure en une seule fois. Une fois la chambre de mesure remplie, un signal sonore indique le début de l’analyse par l’appareil.
- Site de ponction : Le doigt est généralement le site favorisé pour un prélèvement sanguin capillaire chez l’adulte. Privilégier le prélèvement sur le majeur et l’annulaire, éviter le pouce et l’index en raison des callosités mais également le petit doigt car les tissus sont très fins. Dans certains cas, le lobe de l’oreille peut être préféré en se révélant plus pratique dans certaines situations, à l’exercice par exemple. Celui-ci peut également être privilégié lorsque le sujet est dans une position pouvant entraîner une réduction du flux sanguin au niveau des doigts, notamment chez le cycliste par la tenue du cintre du vélo.
Il n’est pas rare d’obtenir des résultats inattendus par un mauvais processus de prélèvement. De nombreuses erreurs peuvent subvenir durant ce processus : réactif périmé, pollution de l’échantillon, volume de sang insuffisant, etc.
Interprétation de la Lactatémie
Une mesure de la lactatémie ne peut être interprétée seule. Les variations analytiques peuvent dépendre de la méthode de prélèvement sanguin et du temps écoulé entre le prélèvement sanguin et l’analyse. L’analyse doit être effectuée rapidement.
Lactatémie physiologique
Un organisme sain produit des lactates de manière physiologique. Une équipe a comparé les lactatémies de 68 chiots âgés de 4 à 80 jours avec celles de 30 chiens adultes. Ilkiw et al. ont dosé la lactatémie chez des Greyhounds bien portants avant et après qu’ils aient effectué une course. La lactatémie est passée de 0,57 mmol / l à plus de 28 mmol / l suite à l’exercice.
Hyperlactatémie
L’hyperlactatémie peut être associée à de nombreuses situations pathologiques. Chez le chat, l’hyperlactatémie a été plus rarement décrite. Lorsqu’une hyperlactatémie est mesurée, cela peut signifier qu’un état de choc est présent, même s’il n’est que débutant et compensé. Les apports en oxygène ne sont pas suffisants pour couvrir les besoins du patient. L’objectif du réanimateur est d’utiliser tous les moyens dont il dispose afin de les ramener chacune aux valeurs considérées comme normales pour le patient. Une accumulation de lactate dans le sang supérieure à 7 mmol/L conduit à une acidose lactique.
Si plusieurs types d’hyperlactatémie ont été décrits, elle peut être la conséquence d’un déficit en oxygène à l’échelle cellulaire. Les cellules du corps produisent de l’énergie en convertissant le glucose en pyruvate, qui est ensuite converti en Acétyl-coenzyme A, la principale source d’énergie du corps. La dernière partie du procédé dépend de l’oxygène. Une demande énergétique élevée en état de choc déclenche une consommation de glucose plus élevée, saturant le métabolisme dépendant de l’oxygène.
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Importance Clinique de la Mesure du Lactate
Dans la pratique quotidienne, la mesure de la lactatémie est le moyen le plus simple et le plus accessible pour le praticien d’évaluer l’oxygénation des tissus du patient.
Lactatémie et pronostic
En médecine humaine, de nombreuses publications font état d’une corrélation entre une hyperlactatémie mesurée à l’admission du patient et la mortalité. L’aspect pronostique de la lactatémie à l’admission du patient a aussi été étudié chez l’animal de compagnie. Prenons pour exemple le syndrome de dilatation torsion d’estomac chez le chien. Cette affection est rencontrée régulièrement par tous les vétérinaires.
Une équipe a considéré que le métabolisme des mammifères était trop complexe pour n’être appréhendé que par la mesure d’un métabolite. Ils ont posé pour hypothèse que la mortalité d’un animal au cours de son hospitalisation serait mieux corrélée à plusieurs variables mesurées à l’admission. C’est la notion de score. La lactatémie fait partie des variables mesurées dans les deux espèces (chien et chat). A chaque valeur de ces variables correspond un chiffre. La somme de ces chiffres constitue le score. L’hypothèse émise est qu’une diminution de la lactatémie au cours de l’hospitalisation serait significativement corrélée à la survie du patient.
Applications spécifiques
Les kits d’analyse du lactate sont des outils essentiels pour quantifier les niveaux de lactate dans des échantillons biologiques, offrant des informations sur le métabolisme cellulaire dans divers domaines de recherche tels que la biologie du cancer, l'immunologie, la différenciation des cellules souches et la recherche sur le diabète. Le lactate est associé à divers effets cellulaires.
Facteurs de confusion et limites
Divers facteurs peuvent influencer les niveaux de lactate et doivent être pris en compte lors de l'interprétation des résultats:
- Solutés de perfusion : L’attention du lecteur est portée sur le fait que l’utilisation de Ringer Lactate comme soluté de perfusion n’est pas incriminée. Enfin, certains auteurs ont décrit une hyperlactatémie iatrogène.
- Traitements : Dans l’exemple du syndrome de dilatation torsion d’estomac chez le chien, certains patients recevront un soluté cristalloïde isotonique, d’autres un mélange de soluté cristalloïde isotonique et hypertonique, d’autres encore recevront des colloïdes de synthèse. D’un point de vue statistique, il est difficile de comparer deux individus qui n’ont pas reçu le même traitement.
- Variabilité analytique : Les variations analytiques peuvent dépendre de la méthode de prélèvement sanguin et du temps écoulé entre le prélèvement sanguin et l’analyse.
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