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Dosage de l'hCG en Laboratoire Vétérinaire : Applications et Implications

Introduction

L'hormone gonadotrophine chorionique humaine (hCG) est une hormone glycoprotéique produite naturellement pendant la grossesse. En médecine vétérinaire, le dosage de l'hCG est utilisé dans divers contextes, allant du diagnostic de gestation à la gestion de problèmes de fertilité chez les animaux. Cet article explore en profondeur les applications du dosage de l'hCG en laboratoire vétérinaire, en mettant en lumière son rôle dans différentes espèces et les implications cliniques de ses résultats.

Détection de la Grossesse

Test de grossesse sanguin 7MED

Le test de grossesse sanguin 7MED est un test immunochromatographique qui détecte l'hormone β-hCG dans le sang. Il est conçu pour l'auto-diagnostic de grossesse et a une sensibilité de 10 mUI/ml avec un résultat rapide en 5 minutes. Il est recommandé d’utiliser le test de grossesse sanguin au plus proche de la date présumée des règles pour obtenir la meilleure fiabilité. Le test est considéré comme positif si une ligne colorée apparaît dans la zone "T" du test.

Utilisation et Précautions

Le test est à usage unique et doit être utilisé immédiatement après l'ouverture du sachet. Il doit être conservé entre 4°C et 30°C et est stable jusqu'à la date de péremption indiquée sur la boîte. Le sang doit être immédiatement transféré sur la bandelette test, et le test doit être placé sur une surface plane en attendant le résultat.

Gestion de la Fertilité

Utilisation de l'hCG en Médecine de la Fertilité

L'hCG est une hormone naturelle utilisée en médecine de la fertilité pour déclencher l'ovulation ou traiter certaines formes d'hypogonadisme chez l'homme. En médecine vétérinaire, elle peut être utilisée pour traiter les dysovulations (ovulation tardive, absence d’ovulation) et la nymphomanie chez les femelles, ainsi que pour la stimulation de la libido et le traitement de la cryptorchidie chez les mâles.

Administration et Dosage

L'hCG est principalement administrée sous forme injectable, avec des dosages courants allant de 1000 UI à 10000 UI. La reconstitution se fait à partir de flacons de poudre à reconstituer ou de seringues préremplies. Chez les femelles, elle peut être utilisée pour traiter les dysovulations (ovulation tardive, absence d’ovulation), nymphomanie. Chez les mâles, elle peut être utilisée pour la stimulation de la libido et le traitement de la cryptorchidie chez le chiot et le poulain. Les doses varient selon l'espèce :

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  • Équins et bovins : 1.500 à 5.000 U.I.
  • Ovins, caprins et porcins : 500 à 1.500 U.I.
  • Chiens et chats : 100 à 500 U.I.

Dans certains cas, il peut être nécessaire de renouveler les injections suivant un rythme qui reste à définir par le vétérinaire.

PG 600Ⓡ : Induction et Synchronisation de l’Œstrus chez la Truie

PG 600Ⓡ est un médicament vétérinaire contenant de la gonadotropine sérique (PMSG) et de la gonadotropine chorionique (hCG). Il est utilisé chez les cochettes prépubères pour l'induction de l'œstrus et de la cyclicité, et chez les truies au sevrage pour l'induction et la synchronisation de l'œstrus, ainsi que pour le traitement de l'anœstrus. La posologie est de 5 mL de solution reconstituée par truie (soit 400 UI de PMSG et 200 UI d’hCG par animal), en une seule administration, par voie intramusculaire ou sous-cutanée.

Diagnostic et Suivi

Dosage de l'AMH et Implications

Le dosage de l'hormone anti-muellérienne (AMH) est utilisé pour exclure ou confirmer une ovariectomie incomplète chez les chattes. Un test de dosage de l'AMH a été évalué par des cliniciens de la faculté vétérinaire de Münich (Allemagne) dans ce but, tout en étant comparé à d'autres approches : recherche de fragment ovarien par échographie, frottis vaginal, dosage de la progestérone après stimulation à l'hCG et - le ‘gold standard' : la laparotomie couplée à l'analyse histologique.

Protocole d'Étude et Résultats

Une étude a inclus 15 chattes non stérilisées, 10 chattes stérilisées (et ne présentant pas de chaleurs par la suite) et 15 chattes « présentant des signes de chaleurs après la stérilisation ». Le test de dosage de l'AMH se fait par immunochimioluminescence. Il est mis en œuvre par un laboratoire d'analyses vétérinaires, et a été validé pour l'espèce féline. Il présente une variabilité intra-test < 2 %, une variabilité inter-tests <8 % et une limite de quantification de 0,01 ng/ml. Toutes les chattes stérilisées et sans signes de chaleurs avaient une concentration en AMH inférieure à la limite de détection du test. La concentration moyenne d'AMH des chattes présentant des chaleurs malgré la stérilisation était significativement plus élevée que celle des chattes stérilisées (p=0,025) et significativement plus faible que celle des chattes intactes (p=0,001).

Interprétation et Diagnostic

Les auteurs estiment donc que le dosage de l'AMH peut être utile et recommandent que la consultation se fasse pendant la manifestation des signes de chaleurs. Dans la discussion, les auteurs reviennent sur une des chattes à signes de chaleurs, et qui a fourni un résultat positif au dosage AMH.

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Précautions et Considérations

Vente et Administration de l'hCG

En France, la vente de médicaments sur ordonnance tels que l’HCG n’est pas autorisée directement sur un site web grand public. La vente en ligne de médicaments sur ordonnance est conditionnée à la présentation d’une ordonnance valide et à l’agrément de la pharmacie. Tenter d’acheter de la HCG sans ordonnance expose à des produits contrefaits, potentiellement dangereux, et à des poursuites administratives ou pénales.

Effets Indésirables et Contre-Indications

Comme avec toutes les spécialités contenant des protéines, des réactions de type anaphylactoïde peuvent dans de rares cas se produire. Un traitement à base d’adrénaline et de glucocorticoïdes doit être rapidement instauré. Il est important de notifier les effets indésirables. Ne pas utiliser en cas d’hypersensibilité aux substances actives, chez les truies présentant des ovaires polykystiques, chez les animaux gestants, ou chez les truies atteintes d’infections utérines ou vaginales.

Mises en Garde Spécifiques

L’administration du traitement au cours de la phase lutéale primaire ou en milieu du cycle pourrait favoriser le développement de kystes ovariens. Ne pas modifier la posologie. Des précautions d’asepsie devront être prises au moment de l’injection.

Méthodes de Prélèvement et Préparation des Échantillons

Techniques Générales de Prélèvement

  1. Préparation du Site de Prélèvement :
    • Pour une ponction cutanée, le site doit être propre et un léger nettoyage avec un tampon d’alcool est généralement suffisant.
    • Une préparation chirurgicale du site de ponction devrait être effectuée si une culture bactériologique est envisagée ou si une cavité corporelle est pénétrée (ex. thorax, abdomen, articulation).
  2. Ponction à l’Aiguille Fine :
    • La ponction à l’aiguille fine sans aspiration est la technique de choix pour la majorité des masses cutanées ainsi que pour de nombreux autres sites et tissus.
    • Elle s’effectue par simple ponction de la lésion en utilisant une technique sans aspiration (avec aiguille démontée) ou une technique avec aspiration en employant une seringue attachée à l’aiguille.
    • Le prélèvement s’effectue par l’exécution de nombreux mouvements de « va-et-vient » afin d’introduire des cellules et des fragments tissulaires dans l’aiguille. Il est recommandé de changer l’orientation de l’aiguille plusieurs fois au cours du prélèvement.
  3. Prélèvement par Aspiration :
    • Un prélèvement par aspiration peut être utilisé si la ponction avec aiguille démontée ne permet pas d’obtenir un échantillon suffisamment cellulaire.
    • La lésion est d’abord ponctionnée avec une aiguille fixée à une seringue dont le piston est préalablement rempli d’air (2 à 5 ml). Une fois le tissu pénétré, une pression négative est exercée à plusieurs reprises en retirant le piston jusqu’au 3/4 du volume de la seringue pour favoriser le détachement cellulaire/tissulaire.
    • Une pression négative excessive doit être évitée pour ne pas rompre les vaisseaux environnants et ainsi causer une contamination sanguine périphérique.
  4. Impressions de Lésions Cutanées :
    • Les impressions de lésions cutanées s’effectuent simplement en y apposant une lame et en exerçant une légère pression de telle sorte que les cellules adhèrent par capillarité.
  5. Grattages Cutanés :
    • Les grattages cutanés peuvent se réaliser au moyen d’une lame de bistouri émoussée en effectuant des mouvements de façon unidirectionnelle et perpendiculairement à la surface de la lésion.
    • Le matériel récolté est ensuite déposé sur une lame de verre puis étalé. Idéalement, le grattage doit être suffisamment profond pour provoquer une exsudation de fluides tissulaires ou un léger saignement à la surface de la peau.
  6. Écouvillonnage :
    • L’écouvillon est essentiellement utilisé pour les lésions fistuleuses ou orifices naturels.
    • Il est légèrement humecté avec de la saline stérile, puis roulé ou frotté contre la surface à échantillonner. Le matériel est déposé sur une lame (par roulement) pour l’examen cytologique.

Préparation des Lames pour Cytologie

  1. Étalement du Matériel :
    • Après le prélèvement, le contenu de l’aiguille est éjecté sur une lame de verre propre sur laquelle une deuxième lame est déposée délicatement et perpendiculairement à la première.
    • L’échantillon est étalé en faisant glisser les deux lames l’une par rapport à l’autre. Idéalement, l’éjection du matériel doit se faire doucement et à proximité de la lame pour éviter une dispersion en « éclat d’obus » difficile à étaler.
    • Il est important de ne pas appliquer une pression trop forte afin d’éviter une éventuelle rupture cellulaire.
  2. Coloration et Examen :
    • Plusieurs lames devraient être préparées pour chaque lésion prélevée.
    • Une ou deux lames d’une série peuvent être colorées et examinées au microscope par le praticien pour évaluer la cellularité de l’échantillon, la qualité de l’étalement et pour obtenir un diagnostic préliminaire.
    • Les colorants de type rapide comme le Diff-Quick ou le RAL sont généralement utilisés pour la coloration cytologique de routine.

Prélèvement et Conservation des Fluides

  1. Types de Tubes et Conservation :
    • Les liquides doivent être placés dans un tube EDTA (sauf LCS tube sec), expédiés au laboratoire sous 2-3 jours (sauf LCS voir ci-dessous), et maintenus au frais jusqu’à l’envoi.
    • Si une bactériologie/mycologie est demandée conjointement, un tube sec devra être joint.
  2. Liquides Opaque et Cellulaires :
    • Si le liquide apparaît opaque et de cellularité élevée (ex. liquide articulaire), il est recommandé d’effectuer un frottis directement après le prélèvement.
  3. Liquides Peu Cellulaires :
    • Si le liquide semble peu cellulaire (ex. LCS), il est recommandé de centrifuger l’échantillon et de soumettre le culot au laboratoire.
  4. Liquides Cérébrospinaux :
    • Pour les liquides cérébrospinaux, il est recommandé d’ajouter du sérum du même animal (autologue) directement dans le liquide récolté (environ 10% du volume de l’échantillon récolté soit généralement 2-3 gouttes de sérum).

Prélèvement de Sang pour Analyses Spécifiques

  1. Hémostase :
    • Prélèvement d’une veine de gros calibre (éviter une stase prolongée ou un garrot), utiliser un tube de citrate de sodium 3.8% (1 volume de citrate / 9 volumes de sang), mélanger doucement par retournements (vérifier l’absence de caillot).
  2. Mesure de la Glycémie :
    • Cheval au pré ou nourri avec une petite quantité de foin peu riche en sucres (trempé), n’ayant pas reçu de concentrés dans les 4-6 heures précédentes.

Prélèvement de Poils et de Croûtes

  1. Technique de Brossage et d’Arrachage :
    • Avec une brosse à dents à poils souples (neuve et dans un emballage unique), brosser énergiquement la zone atteinte (en périphérie) pendant 2-3 minutes jusqu’à remplir la brosse à dents avec les poils de l’animal.
    • Arracher des groupes de poils en périphérie de la zone atteinte (ex. pince hémostatique) et les envoyer dans un tube sec, flacon ou sachet.

Autres Applications Diagnostiques

Diagnostic du Syndrome de Cushing

Il existe une variation saisonnière des normes. Mi-Juillet à mi-Novembre : < 50 pg/ml (< 100 pg/ml selon certaines références notamment chez les poneys). Un premier contrôle est réalisé 30 jours après le début du traitement. Le stress peut influencer les résultats.

Testostéronémie

La testostéronémie basale varie d’heure en heure et selon la saison. Une valeur basale élevée (sans stimulation) est compatible avec la présence de tissu testiculaire (surtout évident durant la période de reproduction).

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Troponine I

La troponine I est un biomarqueur cardiaque lésionnel qui peut être utile dans les lésions du myocarde, notamment lors de myocardite aiguë d’origine virale (ex. influenza, morbillivirus), bactérienne.

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