Introduction
Le dosage ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) est une technique biochimique largement utilisée en immunologie pour détecter et quantifier la présence d'une substance, généralement un antigène, dans un échantillon. Cet article se concentre sur l'application du principe ELISA dans le contexte spécifique du dosage de l'HCG (Human Chorionic Gonadotropin), une hormone cruciale dans la détection précoce de la grossesse. Les kits de détection précoce de la grossesse détectent la hCG, l'hormone qui confirme la grossesse, dans les jours précédant l'absence de règles.
Principe de l'ELISA
L'ELISA, dans son application au dosage de l'HCG, repose sur un test immunoenzymatique (ELISA) en phase solide basé sur le principe du sandwich. Le principe de l'ELISA compétitif est également utilisé. En général, l'ELISA implique les étapes suivantes :
- Revêtement: Une surface solide (par exemple, une plaque de microtitration) est revêtue d'un anticorps spécifique à l'HCG.
- Blocage: Les sites de liaison non spécifiques sur la plaque sont bloqués pour éviter les faux positifs.
- Incubation avec l'échantillon: L'échantillon (par exemple, sérum, plasma ou urine) est ajouté à la plaque, permettant à l'HCG présente de se lier à l'anticorps fixé.
- Ajout d'un anticorps de détection: Un deuxième anticorps, également spécifique à l'HCG et conjugué à une enzyme, est ajouté. Cet anticorps se lie à l'HCG déjà capturée sur la plaque.
- Ajout du substrat enzymatique: Un substrat spécifique à l'enzyme conjuguée est ajouté. L'enzyme réagit avec le substrat, produisant un changement de couleur.
- Lecture: L'intensité de la couleur est mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre. L'intensité est directement proportionnelle à la quantité d'HCG présente dans l'échantillon.
Application du DRG HCG ELISA
Le DRG HCG ELISA est un test de diagnostic in vitro utilisé pour la détermination quantitative de l'HCG dans le sérum humain. Il est utilisé pour :
- Détection précoce de la grossesse: Le kit de détection précoce de la grossesse détecte la hCG, l'hormone qui confirme la grossesse, dans les jours précédant l'absence de règles.
- Surveillance de la grossesse: Le dosage de l'HCG peut être utilisé pour surveiller la progression de la grossesse et détecter d'éventuelles complications.
- Diagnostic de certaines tumeurs: Certaines tumeurs peuvent produire de l'HCG, et le dosage peut être utilisé dans le diagnostic et le suivi de ces affections.
Composants typiques d'un kit DRG HCG ELISA
Un kit DRG HCG ELISA typique contient les composants suivants :
- Plaque de microtitration revêtue d'anticorps anti-HCG.
- Anticorps de détection anti-HCG conjugué à une enzyme.
- Solution de substrat enzymatique.
- Solution d'arrêt.
- Tampons de lavage.
- Standards d'HCG de différentes concentrations.
- Contrôles positifs et négatifs (éventuellement).
Procédure Générale
Bien que les détails spécifiques puissent varier selon le fabricant, la procédure générale pour effectuer un dosage DRG HCG ELISA est la suivante :
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- Préparer les réactifs et les échantillons selon les instructions du fabricant.
- Ajouter les standards, les échantillons et les contrôles aux puits de la plaque.
- Incuber la plaque pendant une période spécifiée.
- Laver la plaque pour éliminer les composants non liés.
- Ajouter l'anticorps de détection conjugué à l'enzyme.
- Incuber la plaque à nouveau.
- Laver la plaque.
- Ajouter la solution de substrat.
- Incuber jusqu'à ce qu'une couleur se développe.
- Ajouter la solution d'arrêt pour arrêter la réaction enzymatique.
- Lire l'absorbance de chaque puits à l'aide d'un spectrophotomètre.
- Générer une courbe standard en traçant l'absorbance en fonction de la concentration des standards d'HCG.
- Déterminer la concentration d'HCG dans les échantillons en utilisant la courbe standard.
Autres tests et marqueurs
Il est important de noter que l'HCG n'est qu'un des nombreux marqueurs et tests utilisés dans le diagnostic médical. D'autres tests incluent :
- Aldostérone et Rénine: Cartouches d'immunoréaction pour la mesure quantitative de l'aldostérone et de la rénine active, utilisées avec le système LUMIPULSE G.
- Cortisol: Test effectué pour vérifier l'augmentation ou la diminution de la production de cortisol, une hormone qui régule la réponse du corps au stress.
- Troponine T cardiaque hautement sensible (hs-cTnT): Test pour la détermination quantitative de la hs-cTnT dans le sérum et le plasma humains, utilisé pour le diagnostic des maladies cardiaques et l'infarctus du myocarde.
- Peptide natriurétique de type B (BNP): Test pour la détermination quantitative in vitro du BNP dans le plasma humain, utilisé comme aide au diagnostic des patients suspectés d'insuffisance cardiaque.
- D-Dimer: Test d'immunofluorescence pour la détermination quantitative in vitro du D-Dimer dans des échantillons de plasma ou de sang total humain.
- Myéloperoxydase (MPO): Kit d'immunoanalyse par fluorescence MPO POCT utilisé pour la détection quantitative de la concentration de myéloperoxydase (MPO) dans le plasma humain.
- Anticorps anti-phospholipides: AESKU.DIAGNOSTICS offre le panel le plus complet de tests anti-phospholipides, incluant les anticorps contre la β2- glycoprotéine I humaine native et contre la cardiolipine hautement purifiée.
- Troponine I cardiaque (cTnI): ELISA cTnI est destiné à la détermination quantitative de la troponine I cardiaque dans le sérum humain.
- LH (Hormone Lutéinisante): Le test LH peut donc montrer dans quelle période de votre cycle vous vous trouvez et donner un aperçu des symptômes de la ménopause. Vous voulez savoir si vous êtes fertile ou si vous avez des symptômes de la ménopause ? Le réactif est utilisé pour détecter qualitativement la LH dans l'urine selon le principe de la méthode sandwich à double anticorps.
- Magnésium: Kit est utilisé pour détecter quantitativement la teneur en ions magnésium dans le sérum humain in vitro.
Facteurs pouvant affecter les résultats
Plusieurs facteurs peuvent affecter les résultats du dosage DRG HCG ELISA, notamment :
- Erreurs de manipulation: Des erreurs dans la préparation des réactifs, l'ajout des échantillons ou le lavage de la plaque peuvent entraîner des résultats inexacts.
- Interférence: Certaines substances présentes dans l'échantillon peuvent interférer avec la réaction ELISA, entraînant des faux positifs ou des faux négatifs.
- Réactivité croisée: L'anticorps utilisé dans le dosage peut réagir avec d'autres substances présentes dans l'échantillon, entraînant des faux positifs.
- Conditions de stockage: Les kits de réactifs doivent être conservés à 2-8℃ et être utilisés avant la date de péremption. Après ouverture, les réactifs R1, R2 peuvent être conservés à l'abri de l'air à 2-8oC pendant 7 jours maximum. Ne pas congeler.
- Phases du cycle menstruel: 38% des femmes ne connaissent pas leur période d’ovulation.
Avantages de l'ELISA
L'ELISA offre plusieurs avantages par rapport à d'autres méthodes de dosage, notamment :
- Sensibilité: L'ELISA est une méthode très sensible qui peut détecter de faibles quantités d'HCG.
- Spécificité: L'ELISA est une méthode spécifique qui utilise des anticorps pour cibler l'HCG.
- Facilité d'utilisation: L'ELISA est une méthode relativement facile à utiliser qui peut être automatisée.
- Rentabilité: L'ELISA est une méthode rentable qui peut être utilisée pour tester un grand nombre d'échantillons.
Immunochromatographie
En plus de l'ELISA, l'immunochromatographie est une autre méthode utilisée pour la détection de l'HCG. Le kit est basé sur le principe de l'immunochromatographie à l'or colloïdal. test contient : 1. Anticorps monoclonaux anti HCG marqués à l’or colloïdal et complexe d'anticorps de contrôle de qualité. 2.
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